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香港壎芵p結核參比實驗室工作簡介

     香港特別行政區壎芵p病理部轄下的結核參比實

驗室(以下簡稱本實驗室),主要提供有關結核桿菌

及其他分枝桿菌的病理檢驗,用以支援胸肺科服

務。此外,本實驗室亦負責組織及參與結核病的監察

及流行病學研究。同時,本實驗室亦提供結核桿菌培

養呈陽性反應的病人資料,作為結核病呈報系統之用。

目前本實驗室收取由政府胸肺科門診、部份醫院管理

局轄下的醫院、私家實驗所、及執業醫生所提供的標

本,用作常規塗檢及細菌培養檢驗。此外,本實驗室

亦收取由醫院實驗室及私家實驗所提供的陽性培養樣

本,用以進行菌種鑒定及藥物敏感測試。



     為提高檢驗結果的精確度,本實驗室組織及參與

多個質量監測計劃,並與香港醫事技術學會(Hong Kong 

Medical Technology Association)合作提供一個名為「分

枝桿菌塗片質量監測計劃」以給予大多數香港臨床實

驗室參與。另外本實驗室亦分別參與了United Kingdom 

NEQAS(Microbiology Quality Assessment Scheme)及

World Health Organization Supranational Reference 

Laboratory舉辦的對外質量監測計劃,對實驗室的塗

片、培養及藥物敏感測試作品質檢定。



本實驗室主要提供以下八類服務 :



一、	直接抗酸桿菌塗片檢查

二、	從痰樣本中進行核酸擴增直接檢查結核分枝桿

        菌

三、	從臨床標本中初步分離分枝桿菌

四、	分枝桿菌菌種鑒定

五、	藥物敏感測試

六、	利用結核分枝桿菌的DNA限制性片段長度多

        態性(RFLP)分析,於結核病爆發期中提供研

        究資料

七、	尿液樣本中異 (INAH)新陳代謝物測試

八、	研究及訓綀







1.     直接抗酸桿菌塗片檢查(塗檢)

   

    與培養方法比較,直接抗酸桿菌塗片檢查是-種

較快速的診斷方法。此方法若呈陽性反應,則表示該

病人標本內的含菌量相當高,有很高的傳染性。為確

保病人及公眾的健康,塗檢報告盡可能於廿四小時內

發出,以便可給予病人即時的治療。除此以外,重覆

的塗片檢查更可用作監察塗檢陽性病人化學療程的成

效。



    本實驗室採用敏感度較高的螢光(金銨O)染色

法作為塗片檢查之用。採用此方法,每亳升標本需含

5000-10000條桿菌才可呈陽性反應。與細菌培養比較,

塗檢的敏感度約為22- 43%。本法的缺點在於只能鑒別

分枝桿菌的存在而不能分辨分枝桿菌的類形。







2.  從痰樣本中進行核酸擴增直接檢查結核分枝桿菌



    由於結核桿菌生長速度緩慢,一般需要3至8 星

期才能得出細菌培養的結果。有見及此,本實驗室採

用由美國食物及藥品管理局(Food and Drug Agency)

認可的核酸擴增結核分枝桿菌直接試驗,從塗檢陽性

的痰標本中直接測試結核桿菌的存在。此項技術的敏

感度(>95%)及特異性(>98%)都很高,而且試驗

報告通常可於兩天內完成。此項化驗最適合用作鑒別

愛滋病人是否受到結核桿菌或是非結核分枝桿菌所感

染。



    雖然核酸擴增結核分枝桿菌直接試驗能大大縮短

結核病斷診的時間,但對於塗片試驗呈陰性之痰標本,

其敏感度只可達約50%。同時此項技術對於非呼吸

管道樣本之檢驗的應用依然有限。故此,本實驗室的

醫務微生物學家樂意與閣下進行討論如何應用此昂貴

的檢驗技術。





3.  從臨床標本中初步分離分枝桿菌



    成功從病人標本分離病原體(例如結核桿菌)或

重覆分離機會病原體常被用作診斷結核病及其他分枝

桿菌病的標準。由於大部份的分枝桿菌都生長緩慢,

傳統培養方法往往需要3至8 星期才能完成。故此如

有需要,本實驗室可以安排以快速液態培養法作細菌

培養,大約90%的陽性標本會於三星期內得到結果。
    鑒於培養分枝桿菌需要較長的時間,因此要避免

標本受到其他細菌污染並不容易,通常污染率約為百

分之五。



4.  分枝桿菌菌種鑒定
    所有陽性培養物均需鑒別及確實其是否病原體。

為了有效及準確鑒定不同的分枝桿菌,本實驗室採用

多種鑒別的方法:其中包括傳統的生化反應、使用色

譜分析分枝桿菌中的脂肪酸或寡核甘酸、利用核酸探

針、限制性片段多態性分析法及DNA序列測定等的

基因研究進行多方面試驗。
通常培養所分離出來的分枝桿菌數量未必足以應

付鑒定菌種所需,因此可能因需要細菌再培養而延長

菌種鑒定的時間。如有需要,本實驗室可以安排以DNA

探針作為對結核桿菌或鳥胞分枝桿菌(Mycobacterium 

avium complex)的鑒定,一般報告可於兩個工作天內

完成。



5.  藥物敏感測試
    由於結核桿菌的耐藥問題漸呈重要,藥物敏感試驗

可協助臨床醫生找出治療失敗的原因及提供藥物使用

指引。本實驗室提供四種第一線藥物(鏈黴素、異

 、利福平、乙胺丁醇)的常規測試服務。對於重覆

治療、復發、治療失敗、及多重耐藥病人所分離出來

的結核菌,本實驗室更可提供第二線抗結核藥物的藥

敏測試服務。
   本實驗室採用已校準和標準化的絕對濃度法進行常

規藥敏測試,一般需要四星期才能得到結果。如在液

態培養液中進行藥物敏感測試,則需時二至三星期。
   除結核桿菌外,本實驗室也對鳥胞分枝桿菌進行藥

敏測試。至於測試其他菌種,由於測試方式和臨床價

值各有所異,如有需要,請聯絡本實驗室的醫務微生

物學家以作進一步的討論。



6.   結核桿菌的分型
     為了預防及控制結核病,流行病學的研究是必需

的。在這方面,本實驗室利用廣被應用的DNA指紋圖

譜技術(DNA限制性片段長度多態性 <RFLP>  分析)

作為結核桿菌分型所用。此項技術可於懷疑結核病爆

發研究中,提供重要的流行病學資料。



7.  尿液異 (INAH)新陳代謝物測試
    此方法主要用於監測病人吸收異悚滷〞p,同

時也可以用作監測病人有否按時吃藥。通常檢驗報告

可在一星期內完成。



8.  參與研究及訓練
    本實驗室參與很多與胸肺科服務有關的學術及臨

床應用研究,例如抗結核藥物測試、流行病學研究等

等。此外,在壎芵p總部的許可下,本實驗室也會向

到訪的技術員提供短期的結核檢驗訓綀。

                  


 (資料來自香港壎芵p結核參比實驗室)

 (二零零一年十二月十七日)

                  


生物樣本安全工作櫃

生物樣本安全工作櫃

 

培養細菌

培養細菌

 

替樣本清除污染,以培養結核菌

替樣本清除污染,以培養結核菌

 

 

利用螢光(金銨O)染色法在顯微鏡下的結核桿菌

 

利用Ziehl-Neelsen染色法的結核桿菌



用羅、金氐固體培養基培養的結核桿菌

 

 
 
2006copyright logo | 重要告示 最近修訂日期: 二零零六年八月三十一日