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香港卫生署结核参比实验室工作简介

     香港特别行政区卫生署病理部辖下的结核参比实

验室(以下简称本实验室),主要提供有关结核杆菌

及其他分枝杆菌的病理检验,用以支援胸肺科服

务。此外,本实验室亦负责组织及参与结核病的监察

及流行病学研究。同时,本实验室亦提供结核杆菌培

养呈阳性反应的病人资料,作为结核病呈报系统之用。

目前本实验室收取由政府胸肺科门诊、部份医院管理

局辖下的医院、私家实验所、及执业医生所提供的标

本,用作常规涂检及细菌培养检验。此外,本实验室

亦收取由医院实验室及私家实验所提供的阳性培养样

本,用以进行菌种鉴定及药物敏感测试。



     为提高检验结果的精确度,本实验室组织及参与

多个质量监测计划,并与香港医事技术学会(Hong Kong 

Medical Technology Association)合作提供一个名为「分

枝杆菌涂片质量监测计划」以给予大多数香港临床实

验室参与。另外本实验室亦分别参与了United Kingdom 

NEQAS(Microbiology Quality Assessment Scheme)及

World Health Organization Supranational Reference 

Laboratory举办的对外质量监测计划,对实验室的涂

片、培养及药物敏感测试作品质检定。



本实验室主要提供以下八类服务 :



一、	直接抗酸杆菌涂片检查

二、	从痰样本中进行核酸扩增直接检查结核分枝杆

        菌

三、	从临床标本中初步分离分枝杆菌

四、	分枝杆菌菌种鉴定

五、	药物敏感测试

六、	利用结核分枝杆菌的DNA限制性片段长度多

        态性(RFLP)分析,于结核病爆发期中提供研

        究资料

七、	尿液样本中异烟肼 (INAH)新陈代谢物测试

八、	研究及训綀







1.     直接抗酸杆菌涂片检查(涂检)

   

    与培养方法比较,直接抗酸杆菌涂片检查是-种

较快速的诊断方法。此方法若呈阳性反应,则表示该

病人标本内的含菌量相当高,有很高的传染性。为确

保病人及公众的健康,涂检报告尽可能于廿四小时内

发出,以便可给予病人即时的治疗。除此以外,重覆

的涂片检查更可用作监察涂检阳性病人化学疗程的成

效。



    本实验室采用敏感度较高的萤光(金铵O)染色

法作为涂片检查之用。采用此方法,每亳升标本需含

5000-10000条杆菌才可呈阳性反应。与细菌培养比较,

涂检的敏感度约为22- 43%。本法的缺点在于只能鉴别

分枝杆菌的存在而不能分辨分枝杆菌的类形。







2.  从痰样本中进行核酸扩增直接检查结核分枝杆菌



    由于结核杆菌生长速度缓慢,一般需要3至8 星

期才能得出细菌培养的结果。有见及此,本实验室采

用由美国食物及药品管理局(Food and Drug Agency)

认可的核酸扩增结核分枝杆菌直接试验,从涂检阳性

的痰标本中直接测试结核杆菌的存在。此项技术的敏

感度(>95%)及特异性(>98%)都很高,而且试验

报告通常可于两天内完成。此项化验最适合用作鉴别

爱滋病人是否受到结核杆菌或是非结核分枝杆菌所感

染。



    虽然核酸扩增结核分枝杆菌直接试验能大大缩短

结核病断诊的时间,但对于涂片试验呈阴性之痰标本,

其敏感度只可达约50%。同时此项技术对于非呼吸

管道样本之检验的应用依然有限。故此,本实验室的

医务微生物学家乐意与阁下进行讨论如何应用此昂贵

的检验技术。





3.  从临床标本中初步分离分枝杆菌



    成功从病人标本分离病原体(例如结核杆菌)或

重覆分离机会病原体常被用作诊断结核病及其他分枝

杆菌病的标准。由于大部份的分枝杆菌都生长缓慢,

传统培养方法往往需要3至8 星期才能完成。故此如

有需要,本实验室可以安排以快速液态培养法作细菌

培养,大约90%的阳性标本会于三星期内得到结果。
    鉴于培养分枝杆菌需要较长的时间,因此要避免

标本受到其他细菌污染并不容易,通常污染率约为百

分之五。



4.  分枝杆菌菌种鉴定
    所有阳性培养物均需鉴别及确实其是否病原体。

为了有效及准确鉴定不同的分枝杆菌,本实验室采用

多种鉴别的方法:其中包括传统的生化反应、使用色

谱分析分枝杆菌中的脂肪酸或寡核甘酸、利用核酸探

针、限制性片段多态性分析法及DNA序列测定等的

基因研究进行多方面试验。
通常培养所分离出来的分枝杆菌数量未必足以应

付鉴定菌种所需,因此可能因需要细菌再培养而延长

菌种鉴定的时间。如有需要,本实验室可以安排以DNA

探针作为对结核杆菌或鸟胞分枝杆菌(Mycobacterium 

avium complex)的鉴定,一般报告可于两个工作天内

完成。



5.  药物敏感测试
    由于结核杆菌的耐药问题渐呈重要,药物敏感试验

可协助临床医生找出治疗失败的原因及提供药物使用

指引。本实验室提供四种第一线药物(链霉素、异烟肼

 、利福平、乙胺丁醇)的常规测试服务。对于重覆

治疗、复发、治疗失败、及多重耐药病人所分离出来

的结核菌,本实验室更可提供第二线抗结核药物的药

敏测试服务。
   本实验室采用已校准和标准化的绝对浓度法进行常

规药敏测试,一般需要四星期才能得到结果。如在液

态培养液中进行药物敏感测试,则需时二至三星期。
   除结核杆菌外,本实验室也对鸟胞分枝杆菌进行药

敏测试。至于测试其他菌种,由于测试方式和临床价

值各有所异,如有需要,请联络本实验室的医务微生

物学家以作进一步的讨论。



6.   结核杆菌的分型
     为了预防及控制结核病,流行病学的研究是必需

的。在这方面,本实验室利用广被应用的DNA指纹图

谱技术(DNA限制性片段长度多态性 <RFLP>  分析)

作为结核杆菌分型所用。此项技术可于怀疑结核病爆

发研究中,提供重要的流行病学资料。



7.  尿液异烟肼 (INAH)新陈代谢物测试
    此方法主要用于监测病人吸收异烟肼的情况,同

时也可以用作监测病人有否按时吃药。通常检验报告

可在一星期内完成。



8.  参与研究及训练
    本实验室参与很多与胸肺科服务有关的学术及临

床应用研究,例如抗结核药物测试、流行病学研究等

等。此外,在卫生署总部的许可下,本实验室也会向

到访的技术员提供短期的结核检验训綀。

                  


 (资料来自香港卫生署结核参比实验室)

 (二零零一年十二月十七日)

                  


生物样本安全工作柜

生物样本安全工作柜

 

培养细菌

培养细菌

 

替样本清除污染,以培养结核菌

替样本清除污染,以培养结核菌

 

 

利用萤光(金铵O)染色法在显微镜下的结核杆菌

 

利用Ziehl-Neelsen染色法的结核杆菌



用罗、金氐固体培养基培养的结核杆菌

 

 
 
2006copyright logo | 重要告示 最近修订日期: 二零零六年八月三十一日